何为免疫磁性分离技术

2017-01-09 18:21:49 来源:科技头条 编辑:青草

免疫磁性分离技术结合了免疫学反应的特异性和磁学的磁响应性,因其特异性强、灵敏度高,又可以同现有的其他生物学检测方法结合,是生物分离方面最值得推广的免疫学检测方法之一。

 免疫磁性微球的检测原理及特点

免疫磁性微球(Immunomagnetic beads)指表面包被有抗体的磁性微球,可与样本中具有相应抗原的靶物质特异性地结合,形成抗原-抗体-免疫磁球复合物,因磁性微球的核心为金属小颗粒(Fe3O4等),复合物具有较高的磁响应性,在磁铁磁力的作用下发生定向移动,使复合物与其他物质分离,达到分离、浓缩、纯化特异性抗原物质的目的。免疫磁性微球结合了免疫学反应的高度特异性、磁性微球的磁响应性以及微球独特的表面性质等优点。具有分离速度快,效率高,操作简便,仪器设备简单等特点。一般来说,磁性复合微球的磁含量和表面功能基类别及含量是影响其应用性能的主要因素。磁含量对于免疫磁性微球在磁场中的响应能力产生影响,而表面功能基类别及含量决定免疫磁性微球与生物分子的相互作用。

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免疫磁性微球的人工制备

上个世纪八十年代,Ugelstad等科学家采用原位法成功地制备了一种均匀性和粒度适宜的聚苯乙烯磁性微球,并在磁球表面偶联抗体制备出免疫磁性微球,在早期的研究中,免疫磁性微球被应用在细胞分离领域并取得了良好的分离效果。目前,磁性复合微球的制备方法主要有分散聚合、乳液聚合、无皂乳液聚合、细乳液聚合和悬浮聚合等。磁性微球可以通过物理吸附法或共价法偶联抗体等生物活性物质。

免疫磁球分离方法应用

近些年来,免疫磁性微球在核酸分析、蛋白质分离和纯化、靶向药物载体和食品卫生检测等领域都得到了广泛应用。免疫磁球分离技术检测靶向细胞可分为阳性分选法和阴性分选法。阳性分选法磁球结合的细胞就是所要分离获得的细胞;阴性分选法磁球结合的细胞为不需要细胞,靶细胞因为不被磁球吸附留在缓冲液体系中。随着研究的日益深入,免疫磁性分离技术还可以结合其他的生物分析技术如聚合酶链式反应(PCR)、荧光定量PCR、酶联免疫吸附测定(ELISA)、流式细胞术、免疫荧光显微术、微流控芯片等技术相结合,大幅提高检测的特异性和敏感性,显示了其巨大的应用潜力。


 

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